南昌大学实验报告

学生姓名：学 号：专业班级：

实验类型：√ 验证 □ 综合 □ 设计 □ 创新 实验日期：实验成绩：

实验六细菌淀粉酶和过氧化氢的定性测定

一、实验目的：

通过对淀粉酶和过氧化氢酶的定性测定，加深对酶和酶促反应的感性认识。

二、实验基本原理：

酶是生物细胞产生的、能在体内或体外起催化作用的生物催化剂，是一类具有活性中心和特殊构象的生物大分子。生物体内的一切化学反应，几乎都是在酶的催化下进行的。微生物的酶按它所在细胞的部位分为胞外酶、胞内酶即表面酶。亦可根据其催化作用的底物的不同而命名，如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等等。

本实验对淀粉酶和过氧化氢酶（亦称接触酶）进行定性测定。

细菌淀粉酶能将遇碘呈蓝色的淀粉水解为遇碘不显色的糊精，并进一步转化为糖。淀粉水解后，遇碘不再显蓝色。

过氧化氢酶能将过氧化氢水解为水和氧。

三、主要仪器设备及耗材：

1、 菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌；

2、肉膏胨、淀粉琼脂培养基；0.2％淀粉溶液、革氏碘液、3～10％过氧化氢、枯草芽孢杆菌培养液；

3、试管（18mm×180mm）、试管架、培养皿（φ120mm）、接种环

四、实验步骤：

（一）枯草杆菌培养液中淀粉酶的测定

1、 取4支干净的试管，按0(对照)、1、2、3编号。放在试管架上备用。

2、 往1、2、3号试管中分别加入5、10、15mL的枯草杆菌培养液，再往1、2号试管内分别加入10、5mL蒸馏水。往0（对照）号管内加入15mL蒸馏水。

3、分别往1、2、3号试管中加入0.2％淀粉溶液若干滴，迅速摇匀并记下反应的初始时间。

4、迅速往以上4个试管内分别滴加若干滴碘液，迅速摇匀，这时各管均呈蓝色。

5 、观察结果。注意各管的变化，记下各管蓝色完全消失的时间，并对结果进行分析。

（二）细菌淀粉酶在固体培养基中的扩散实验

1、 将肉膏胨淀粉琼脂培养基加热融化，待冷至45℃左右倒入无菌培养皿内（每皿约10mL），共倒5个，静置待冷凝即成平板。

2、 在无菌操作条件下，所有的平板在培养皿底部贴好标签后，用接种环分别挑取枯草杆菌和大肠杆菌分别在2个平板上点5个点。

3、再打开一个平板，在空气中放置30分钟，盖上培养皿盖。

4、剩余的两个平板处理如下：一个涂布接种土壤悬液，另一个让学生用手在平板里按手印，或取硬币在平板里按一下，或打开培养皿盖摇头、咳嗽等，所有平板倒置于37℃恒温培养箱内培养24-48小时。

5、 观察结果，取出平板，分别在5个平板内菌落周围滴加碘液，观察菌落周围颜色的变化。并记录结果。

（三）过氧化氢酶的定性测定

1、 将培养好的枯草杆菌和大肠杆菌斜面各1支放在试管架上。

2 、用滴管吸取过氧化氢滴加入两管菌种斜面上。

3 、分析结果，把所观察到的现象记录下来，进行分析。

五、实验数据及处理结果

表一 枯草杆菌培养液中淀粉酶的测定结果记录与分析

结果分析：

表二细菌淀粉酶在固体培养基中的扩散实验结果记录与分析

注：产生记为阳性“+”，不产生记为阴性“－”。

结果分析：

表三过氧化氢酶的定性测定结果记录与分析

注：有记为阳性“+”，无记为阴性“－”。

结果分析：

六、实验体会及对实验改进的建议

第二篇：水处理微生物学标准实验报告1

南昌大学实验报告

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实验一光学显微镜的使用及微生物形态的观察

一、实验目的：

1了解光学显微镜的结构、各部分的功能；

2掌握光学显微镜的使用、了解油镜的工作原理，并学习其使用、保养方法；

3 观察微生物的形态，学会生物图的绘制，养成正确的观察习惯；

二、实验基本原理：

微生物都很小，须用显微镜放大后才能看到。观察微生物的一般形态，以普通光学显微镜（常简称为显微镜）最为常用。

普通光学显微镜最大能够将物体放大2000倍左右，通常观察霉菌和酵母菌时，采用100～400倍的放大率，而观察原核微生物，如细菌、放线菌等往往需要放大到900～1500倍左右。

普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分，机械部分包括：镜座（Base）、镜臂（Arm）、镜筒（Tube长度一般为160mm）、镜头转换器（Nosepiece）、载物台（Stage）、粗调焦钮(Coarse adjustment knob)和细调焦钮(Fine adjustment knob)等；光学系统包括采光系统、聚光镜（Condenser）、虹彩光圈（Iris diapHragm附在聚光器上）、接物镜（Objective lens）、接目镜（Eyepiece lens）等。

接物镜常称为镜头，简称物镜，是显微镜中最重要的部分，一般显微镜有3~4和物镜，根据使用方法的差异可分为干燥系和油浸系两组。干燥系物镜包括低倍物镜（4~10x）和高倍物镜（40~45x），使用时物镜与标本之间的介质是空气；油浸系物镜（90~100x）在使用时，物镜与标本之间加有一种折射率与玻璃折射率几乎相等的油类物质（香柏油）作为介质。

衡量显微镜性能好坏的指标主要是显微镜的分辨率，显微镜的分辨率（Resolving power）是指显微镜将样品上相互接近的两点清晰分辨出来的能力，即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力。它主要取决于物镜的分辨能力，物镜的分辨力是所用光的波长和物镜数值口径的函数。分辨率用镜头所能分辨出的两点间的最小距离表示，距离越小，分辨能力越好。可用公式表示：

物镜的数值口径（Numberical aperture），简写为（N.A）：表示从聚光镜发出的锥形光柱照射在观察标本上，能被物镜所聚集的量。可用公式表示：

n——标本和物镜之间介质的折射率

θ——由光源投射到透镜上的光线和光轴之间的最大夹角

光线投射到物镜的角度越大，数值口径就越大。如果采用一些高折射率的物质作介质，如使用油镜时采用香柏油作介质，则数值口径增大，从而提高分辩能力。物镜镜筒上标有数值口径，低倍镜为0.25，高倍镜为0.65，油浸镜为1.25。这些数值是在其它条件都适宜的情况下的最高值，实际使用时，往往低于所标的值。

三、主要仪器设备及耗材：

显微镜；细菌三形涂片、放线菌、曲霉、青霉等教学示范片；

香柏油、二甲苯、擦镜纸等；

四、实验步骤：

1 调光，用低倍镜调光；

2 低倍镜观察（寻找观察目标）。

3 高倍镜观察（选取理想的观察目标）。

4 油镜观察：高倍镜观察后 ?上升镜筒 ? 油镜转至正下方，在载玻片上加一小滴香柏油 ? 小心地下降镜筒使镜头浸在油里 ? 用粗螺旋将镜筒缓慢上升，寻找目标（物象）? 用细螺旋调节，使物象清晰?观察记录。

5 观察完毕。上升镜筒，转动物镜转换器，使油镜物镜偏位。用干净擦镜纸擦去镜头上的油迹，再取一张擦镜纸醮上二甲苯擦去镜头上残留的香柏油，最后再用一张干净的擦镜纸擦去残留在镜头上的二甲苯。

五、实验数据及处理结果

细菌三型涂片油镜观察

放大倍数10×100

六、思考讨论题

P384思考题第一、第二题

七、实验体会及对实验改进的建议