用热板法测试颅痛定的镇痛作用

目的：掌握用热板法测试镇痛药物，比较镇痛效价的方法。

原理：小鼠足底无毛，皮肤裸露，所以对热刺激敏感。

材料：

器材：电子天平、1ml注射器、热板仪

药品：0.2%颅痛定混悬液、生理盐水

动物：雌性小白鼠2只

方法：

1. 将温控热板仪调节在55±0.5℃，放入大烧杯固定。以小鼠放入后至舔后足之间的时间为痛觉反应时间。

2.取雌性小白鼠2只，标记，称重。在给药前，先测试两鼠的痛觉反应时间。取痛反应时间在10~30s内小鼠作以下实验用。

3.1#腹腔注射0.2%颅痛定混悬液0.15ml/10g ，2#腹腔注射生理盐水0.15ml/10g。在给药后15、30、45、60各测痛觉反应1次。在测试中，如60秒内无痛觉反应，应立即取出，并以60秒计。观察两鼠给药前后的表现，并仔细记录观察结果，计算痛阈提高百分率=（药后痛觉反应时间-药前痛觉反应时间）/药前痛觉反应时间×100%。完成实验报告。

结果：

表1 用热板法测定颅痛定的镇痛作用结果

图1. 颅痛定和生理盐水对小鼠痛阈值的影响

分析讨论：

作用机制： 颅痛定为四氢巴汀（左旋），具有良好的镇痛作用，并伴有镇静、安定和催眠作用，进入中枢后优先阻滞脑内DA受体最丰富的脑区的D2受体亚型，然后通过这些神经核与下丘脑弓状核发生神经连接，由此与内啡肽中央导水管灰质内源性抗痛系统相联系，加强脑干部位的抗痛功能，并抑制脊髓背角水平的致痛信息进人脑内，增强阿片肽的功能，最终达到镇痛目的。颅痛定阻断脑内DA受体，抑制痛觉传入和痛反应，增加与痛觉有关的特定脑区域脑腓肽原和内腓肽原的mRNA的表达，促进脑腓肽、内腓肽的释放。

结论：颅痛定能缓解机体疼痛感，提高痛阈值。

第二篇：热板法镇痛实验

热板法镇痛实验

【摘要】 目的：观察麻醉性镇痛药杜冷丁与非麻醉性镇痛药罗通定的镇痛效应。方法：将小鼠置于一定温度的热板上，热刺激小鼠足部产生痛反应，即舔足反应。以小鼠出现舔足的时间作用为痛反应指标，判断药物是否具有镇痛作用。结果：杜冷丁组，罗通定组和对照组小鼠在注射药物前痛阈值无显著性差异（p>0.05）；注射后15min，杜冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为267%,罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为106%，前者明显大于后者(p<0.05）；注射后30min，杜冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为244%，罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为142%，但无统计学显著差异（p>0.05）；60min时，杜冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为104%，罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为58%，但无统计学显著差异（p<0.05）结论： 杜冷丁与罗通定都有镇痛效应，杜冷丁镇痛效应可能比罗通定强。

【关键词】：热板法；杜冷丁；罗通定；镇痛

【材料】 小鼠；超级恒温器；2.5g/L dolantin，2.5g/L rotundine sulfate，生理盐水。

【方法】 1．开启超级恒温器，调节超级恒温器温度恒定于55±0.1℃。

2．取雌性小白鼠数只，于实验前预先挑选合格者。方法为：将小白鼠放入瓷罐内记录时间，罐口盖以透明盖，观察到出现舐后足的时间为止，此段时间作为该鼠的热痛反应时间，记录之，凡小白鼠在30秒钟内不舐后足或放入瓷罐内发生逃避、跳跃者弃之。

【观察项目】

1．将筛选合格的小白鼠3只做好记号为甲、乙、丙，测每只小白鼠的正常痛阈值一次，作为该鼠给药前痛阈值。

2．甲鼠腹腔注射（i.p.）dolantin溶液25mg/kg(2.5g/L ，0.1ml/10g)，乙鼠

i.p. rotundine 溶液25mg/kg (2.5g/L ，0.1ml/10g)，丙鼠i.p.生理盐水 0.1ml/10g作为对照。用药后15min、30min、60min各测小白鼠痛阈一次，如果用药后放入瓷罐内60秒钟仍无反应，即将小白鼠取出，以免时间太长把脚烫伤，其痛阈可按60秒计算。

3．实验完毕，计算各给药组的用药前后各次的小鼠热痛反应时间(即痛阈值)的平均值，并按下列公式计算痛阈提高百分率。

【实验结果】 1. 杜冷丁组、罗通定组、对照组的小鼠在注射药物前的痛阈值无显著性差异（p>0.05）；

2. 注射后15min，杜冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为267%,痛阈值为55.2±

9.48s，罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为106%，痛阈值为35.60±17.34s，杜冷丁组痛阈提高百分率更大，两者的痛阈值比较有显著性差异（p<0.05）；

3. 注射后30min，杜冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为244%，痛阈值为51.8±10.47 s，罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为142%，痛阈值为41.70±15.38 s，两者痛阈值无显著性差异（p>0.05）；

4. 注射后60min，杜冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为104%，痛阈值为30.70±15.67 s，罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为58%，痛阈值为27.30±18.02s，两者的痛阈值比较没有显著性差异（p<0.05）.

5. 具体实验结果记录与统计处理见下表：

1. 从实验结果看，杜冷丁和罗通定都表出现镇痛效应。

2. 注射杜冷丁后15min痛阈提高率>注射杜冷丁后30min痛阈提高率》注射杜冷

丁后60min痛阈提高率，而注射罗通定后30min痛阈提高率>注射罗通定后15min痛阈提高率》注射罗通定后60min痛阈提高率，由此可见杜冷丁镇痛效应起效快，持续时间较短，罗通定则相反，镇痛效应起效慢，持续时间较长。 3. 从平均值看，各时段杜冷丁的镇痛效应都明显强于罗通定。但是只有在注射后15min时，这一结论在0.05水平上统计学显著，而注射后30min和60min时，在0.05水平上统计学不显著，但在0.1水平上统计学显著。加大样本数量也许可以改善这种状况。

4. 杜冷丁为合成品，是吗啡的代用品，较吗啡成瘾性轻，与吗啡相似，作用于中枢神经系统的阿片受体而发挥作用，抑制神经末梢释放P物质，阻断神经冲动传递。镇痛效力约比吗啡弱十倍，持续时间也比吗啡短。但成瘾性低。

5. 罗通定可以阻断脑内DA受体，抑制痛觉信息在脊髓水平的传递，也可以增加与痛觉有关的特定脑区脑啡肽原和内啡肽原的mRNA表达，促进脑啡肽、内啡肽的释放。镇痛作用比度冷丁弱，但无成瘾性。

【参考文献】

[1]杨世杰. 药理学 2版［M］北京: 人民卫生出版社, 2010. 159页

[2]陆源. 生理科学实验教程 2版 [M] 杭州：浙江大学出版社，2012. 256页